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外泌体研究开展的如火如荼。不论是 SCI 文章的发表还是各类基1金的申请，外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后，研究人员面临的一个重要问题就是，我提取的是不是外泌体？如果是的话，质量如何？
现阶段，对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法：电镜、粒径和 Western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结，今天我们来看看外泌体的粒径分析。
外泌体粒径分析原理
外泌体粒径分析方法为纳米颗粒跟踪分析（Nanoparticle tracking Analysis, NT A)，其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析，结合 Stockes-Einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NT A技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式，NT A技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。
样本准备
1. 提供外泌体悬液即可，未纯化样本也可以上机检测；
注意：NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度，无法区分外泌体与非外泌体成分；当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记，则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml，且有浓度检测下限，为10^5 particles/ml，进样量不少于2ml；一般来说，会对样本稀释后进样；
我司无法准确建议送样量；检测需要量与样本本身浓度有关，样本浓，则用量小，反之则多，根据检测经验，样本取用量一般在2µl-100µl不等，取用量大于50µl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30µl，如样本珍贵，可联系我司寄回，运费视具体情况收取。
外泌体的组成：外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(HSP 70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白，但是不同来源的外泌体的组成有差异。
外泌体的提取方式：
1、离心法：此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足。
2、过滤离心：这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样纯度不足。
3、密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂
4、免1疫磁珠法：这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
5、色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不广泛。
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